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产气荚膜梭菌测定用培养基/用于产气荚膜梭菌的分离培养（日本方法）

HB8311

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250g

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见证书

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产气荚膜梭菌测定用培养基介绍：

用途：用于产气荚膜梭菌的分离培养（日本方法）。

成分(g/L)

多价胨	15.0
大豆胨	7.5
酵母浸粉	7.5
牛肉浸粉	7.5
柠檬酸铁铵	1.0
偏重亚硫酸钠	1.0
L-半胱氨酸盐酸盐	0.75
琼脂	20.0
pH值7.6±0.1	25℃

检验原理：

多价胨、大豆胨、酵母浸粉、牛肉浸粉为微生物的生长提供碳氮源、维生素和生长因子；柠檬酸铁铵和偏重亚硫酸钠用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；L-半胱氨酸盐酸盐可以作为还原剂使用，具有抗氧化的作用，消耗培养基中的游离氧，以降低氧化还原电势，有利于厌氧菌的增菌培养和菌种保存；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品60.25g，加热搅拌溶解于1000ml纯化水中，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中含少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能出现微量沉淀。

产气荚膜梭菌测定用培养基质量控制和典型特征：

在37℃厌氧培养24-48小时，产气荚膜梭菌典型特征为黑色菌落。

产气荚膜梭菌测定用培养基的微生物质控结果：

产气荚膜梭菌测定用培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养18-24小时。

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HB9007-1	卵黄琼脂培养基Egg Yolk Agar Medium	250g	用于肉毒梭菌的分离培养
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HB0253	胰䏡-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础（TSC）Tryptose Sulfite Cycloserine Agar Base	250g	用于产气荚膜梭菌的平板计数(SN标准)因标准更新，停止生产，请采购HB0253-9
HBPT0283	含铁牛乳培养基管（10ml）Iron Milk Medium Tube	10ml*20支	用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验

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GB 4789.28 培养基和试剂的质量要求

适用范围	适用于食品微生物检验中培养基和试剂的质量控制，包括产气荚膜梭菌检测用培养基的性能验证[1][5]。
核心检测方法	规定培养基的理化特性、选择性及促生长能力测试，要求使用标准菌株（如ATCC 13124）验证培养基性能。
检出限与定量限	未明确具体数值，但要求培养基应支持目标菌落的典型形态显示（如黑色菌落形成）。
质控样品要求	需使用标准菌株进行阳性对照，并验证培养基对非目标菌的抑制能力。
关键实验步骤	包括培养基制备的灭菌条件（如煮沸灭菌）、pH值控制（7.6±0.2），以及添加特定抑制剂（如D-环丝氨酸）。
特别说明	强调培养基需避光保存，并在有效期内使用；实验环境需满足厌氧条件。

食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验

适用范围	适用于食品中产气荚膜梭菌的定性和定量检测，包括样品处理、分离培养及鉴定[5][9]。
核心检测方法	采用胰䏡-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂（TSC）进行选择性培养，通过典型菌落形态（黑色）和动力-硝酸盐试验确认。
检出限与定量限	定量检测时报告单位为CFU/g（或mL），检出限为10 CFU/g。
质控样品要求	需同步进行阳性对照（标准菌株）和空白对照，确保培养基有效性。
关键实验步骤	样品需在80℃水浴中加热10分钟以激活芽孢；倾注TSC琼脂后需覆盖第二层培养基隔绝氧气。
特别说明	强调菌落计数需在厌氧条件下培养20-24小时，避免暴露氧气导致假阴性。

饲料中产气荚膜梭菌的检测

适用范围	适用于饲料及其原料中产气荚膜梭菌的检测，包括动物性饲料添加剂[2][7]。
核心检测方法	基于菌落计数技术，使用SC琼脂（亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂）进行选择性培养。
检出限与定量限	定量检测限为100 CFU/g，结果按四舍五入规则修约至两位有效数字。
质控样品要求	每批次检测需包含阴性对照（灭菌生理盐水）和阳性对照（标准菌株）。
关键实验步骤	样品需经过梯度稀释（通常为10⁻¹至10⁻⁶），45℃水浴中混匀后倾注培养基。
特别说明	规定检测环境需符合生物安全二级实验室要求，避免交叉污染。

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