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产气荚膜梭菌测定用培养基/用于产气荚膜梭菌的分离培养(日本方法)_
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产气荚膜梭菌测定用培养基/用于产气荚膜梭菌的分离培养(日本方法)

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产气荚膜梭菌测定用培养基介绍:

用途:用于产气荚膜梭菌的分离培养(日本方法)

成分(g/L)

多价胨15.0
大豆胨7.5
酵母浸粉7.5
牛肉浸粉7.5
柠檬酸铁铵1.0
偏重亚硫酸钠1.0
L-半胱氨酸盐酸盐0.75
琼脂20.0
pH值7.6±0.125℃

检验原理:

多价胨、大豆胨、酵母浸粉、牛肉浸粉为微生物的生长提供碳氮源、维生素和生长因子;柠檬酸铁铵和偏重亚硫酸钠用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;L-半胱氨酸盐酸盐可以作为还原剂使用,具有抗氧化的作用,消耗培养基中的游离氧,以降低氧化还原电势,有利于厌氧菌的增菌培养和菌种保存;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:

称取本品60.25g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。

注:培养基中含少量柠檬酸铁铵,灭菌后可能出现微量沉淀。

产气荚膜梭菌测定用培养基质量控制和典型特征:

在37℃厌氧培养24-48小时,产气荚膜梭菌典型特征为黑色菌落。

产气荚膜梭菌测定用培养基的微生物质控结果:

产气荚膜梭菌测定用培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃厌氧培养18-24小时。

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HB9007-1卵黄琼脂培养基Egg Yolk Agar Medium250g用于肉毒梭菌的分离培养
HB8518-1GAM培养基Gifu Anaerobic Medium250g用于厌氧菌的培养
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HBPT0283含铁牛乳培养基管(10ml)Iron Milk Medium Tube10ml*20支用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验

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GB 4789.28 培养基和试剂的质量要求

适用范围适用于食品微生物检验中培养基和试剂的质量控制,包括产气荚膜梭菌检测用培养基的性能验证[1][5]。
核心检测方法规定培养基的理化特性、选择性及促生长能力测试,要求使用标准菌株(如ATCC 13124)验证培养基性能。
检出限与定量限未明确具体数值,但要求培养基应支持目标菌落的典型形态显示(如黑色菌落形成)。
质控样品要求需使用标准菌株进行阳性对照,并验证培养基对非目标菌的抑制能力。
关键实验步骤包括培养基制备的灭菌条件(如煮沸灭菌)、pH值控制(7.6±0.2),以及添加特定抑制剂(如D-环丝氨酸)。
特别说明强调培养基需避光保存,并在有效期内使用;实验环境需满足厌氧条件。

GB 4789.13-2012 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验

适用范围适用于食品中产气荚膜梭菌的定性和定量检测,包括样品处理、分离培养及鉴定[5][9]。
核心检测方法采用胰䏡-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂(TSC)进行选择性培养,通过典型菌落形态(黑色)和动力-硝酸盐试验确认。
检出限与定量限定量检测时报告单位为CFU/g(或mL),检出限为10 CFU/g。
质控样品要求需同步进行阳性对照(标准菌株)和空白对照,确保培养基有效性。
关键实验步骤样品需在80℃水浴中加热10分钟以激活芽孢;倾注TSC琼脂后需覆盖第二层培养基隔绝氧气。
特别说明强调菌落计数需在厌氧条件下培养20-24小时,避免暴露氧气导致假阴性。

GB/T 26425-2010 饲料中产气荚膜梭菌的检测

适用范围适用于饲料及其原料中产气荚膜梭菌的检测,包括动物性饲料添加剂[2][7]。
核心检测方法基于菌落计数技术,使用SC琼脂(亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂)进行选择性培养。
检出限与定量限定量检测限为100 CFU/g,结果按四舍五入规则修约至两位有效数字。
质控样品要求每批次检测需包含阴性对照(灭菌生理盐水)和阳性对照(标准菌株)。
关键实验步骤样品需经过梯度稀释(通常为10⁻¹至10⁻⁶),45℃水浴中混匀后倾注培养基。
特别说明规定检测环境需符合生物安全二级实验室要求,避免交叉污染。

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