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多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基/用于产气荚膜梭菌糖(醇)发酵的基础培养基_
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多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基/用于产气荚膜梭菌糖(醇)发酵的基础培养基

HB0258 Polypeptone Yeast Extract Medium {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 250g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}
多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基介绍:

用途用于产气荚膜梭菌糖(醇)发酵的基础培养基

成分(g/L)

多价胨20.0
酵母膏5.0
氯化钠5.0
pH6.9±0.125

检验原理:多价胨和酵母膏提供细菌生长的基本营养,氯化钠维持渗透压,产气荚膜梭菌可分解糖醇类产酸并产生大量气体,使用倒管可收集到气体进行观察,滴加酚红溶液可观察产酸现象。

用法:

称取本品30.0g,并加入10g糖或醇加热溶解于1000ml蒸馏水中分装到螺帽试管内每管9ml,121℃高压灭菌15分钟备用。

生长现象及结果观察:

将待测菌株接种至硫乙醇酸盐流体培养基中36±1℃培养24h,取0.1mL的培养物接种至PY培养基中培养48小时,观察倒管中是否有气体出现。取1mL培养物转移到小试管中,滴加1-2滴0.04%的酚红溶液,检查是否产酸。若呈现黄色,则代表产酸,若为红色则未产酸。

气荚膜梭菌产酸现象(乳糖),滴加酚红后显黄色

产气荚膜梭菌产气现象(乳糖),倒管内有气体出现,液面也能看到明显气泡

多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃厌氧培养48小时。

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SN标准(产气荚膜梭菌检测相关)解读
适用范围 适用于食品、环境样本中产气荚膜梭菌的分离与培养,特别针对其在厌氧条件下的增殖特性设计。
核心检测方法 1. 样品预处理:按标准方法制备样品液,稀释至适宜浓度。
2. 增菌培养:使用mEC或mTSB肉汤37℃增菌18-24小时,促进目标菌生长。
3. 分离培养:接种至PY培养基,厌氧条件下37℃培养24-48小时,观察菌落形态。
检出限与定量限 检出限:1 CFU/g(基于标准菌株验证)。
定量限:10 CFU/g,需通过梯度稀释与平板计数法确认。
质控样品要求 1. 阳性对照:产气荚膜梭菌标准菌株(ATCC 13124),需在PY培养基上形成典型菌落。
2. 阴性对照:大肠杆菌(ATCC 25922),应无生长或抑制。
3. 空白对照:未接种培养基,应无污染。
关键实验步骤 1. 培养基配制:按比例称取PY干粉,蒸馏水溶解后121℃灭菌15分钟。
2. 接种方法:使用3mm接种环或定量移液器,确保接种量一致性。
3. 培养条件:严格厌氧环境(如厌氧罐),37℃培养24-48小时,避免氧气干扰。
特别说明 1. 培养基质量控制:每批次需进行性能验证,包括pH(7.2±0.2)、无菌试验及灵敏度测试。
2. 结果判读:产气荚膜梭菌在PY培养基上呈灰白色、边缘整齐的圆形菌落,伴有双环溶血现象。
3. 保存条件:未开封干粉需避光干燥保存(2-25℃),开封后需密封防潮,配制后培养基建议2-8℃保存≤7天。

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