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梭菌强化培养基(USP标准)(Reinforced medium for clostridia)/用于梭菌的增菌培养和计数

HB0316-3

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250g

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梭菌强化培养基(USP标准)(Reinforced medium for clostridia)介绍：

用途：用于梭菌的增菌培养和计数。

用法：

Suspend 38.0g/litre,dispense into tubes,autoclave (15min at 121℃).

称取本品38.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,煮沸1分钟,分装试管,121℃高压灭菌15分钟,备用。

注：培养基中含少量淀粉，若灭菌前未加热煮沸溶解，灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。

梭菌强化培养基（USP标准）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃厌氧培养48小时。

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一、适用范围

该培养基适用于梭状芽孢杆菌（如生孢梭菌）的增菌培养及微生物限度检测，尤其在药品、食品等领域的无菌检查中作为关键检测工具。其配方设计满足严格厌氧菌的生长需求，可与其他选择性培养基联合使用以提高检测灵敏度[3]。

二、核心检测方法

采用薄膜过滤法或直接接种法，将样品接种于培养基后，于厌氧环境（如厌氧罐或气体置换系统）中35-37℃培养48-72小时。通过观察菌落形态、产气情况及生化反应（如卵黄反应）进行初步鉴定[3]。

三、检出限与定量限

- 检出限：可检测每克样品中≥10 CFU的梭菌活菌
- 定量限：通过梯度稀释法实现10¹-10⁶ CFU/mL的线性定量，RSD需≤15%[3]

四、质控样品要求

- 阳性对照：使用生孢梭菌（ATCC 19404）接种，培养后应呈现典型菌落（直径2-5mm，灰白色，边缘不规则）
- 阴性对照：培养基灭菌后无菌生长
- 每批次需验证培养基促生长能力，回收率应≥70%[3]

五、关键实验步骤

1. 培养基配制：按说明书称量干粉，加热煮沸至完全溶解，121℃灭菌15分钟
2. 厌氧环境建立：使用厌氧产气袋或氮气置换，确保氧气浓度＜1%
3. 结果判读：培养后需在4小时内完成镜检（芽孢形态）和生化确认[3][5]

六、特别说明

- 培养基中含L-半胱氨酸作为还原剂，开封后需避光保存并于1周内用完
- 检测产毒梭菌时需配合毒素中和剂使用
- 对氧气敏感菌株需采用预还原培养基，配制后2小时内使用[3][5]

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