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氯化钠胰蛋白胨稀释液(TPS)/用于检测亚硫酸盐还原梭菌的样品制备_
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氯化钠胰蛋白胨稀释液(TPS)/用于检测亚硫酸盐还原梭菌的样品制备

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氯化钠胰蛋白胨稀释液(TPS)介绍:

用途:用于检测亚硫酸盐还原梭菌的样品制备。

成分(g/L)

氯化钠8.5g
胰蛋白胨1.0g
pH值7.2±0.1

用法:

称取本品9.5克,加热溶解于1000ml蒸馏水中, 分装三角瓶,每瓶225ml,121℃高压灭菌15分钟备用。

氯化钠胰蛋白胨稀释液微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃厌氧培养45分钟。

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一、适用范围

氯化钠胰蛋白胨稀释液(TPS)主要用于微生物检测实验中样品的稀释与制备,适用于食品、药品、环境等领域致病菌检测的预处理步骤,尤其符合《消毒技术规范》中关于样品稀释的标准化要求。该溶液适用于需氧菌、霉菌及酵母菌等微生物的增菌培养及后续分离鉴定[7][10]。

二、核心检测方法

1. 样品制备:取25g样品与225ml TPS溶液混合,均质后静置形成样品液。
2. 增菌培养:将样品液转移至特定肉汤培养基(如mEC或mTSB),37℃培养18-24小时。
3. 分离鉴定:取增菌液划线接种至选择性培养基(如显色培养基),观察菌落特征[3][7]。

三、检出限与定量限

1. 检出限:通常可检测样品中≥1 CFU/g的微生物污染。
2. 定量限:通过梯度稀释法,可实现101-108 CFU/ml范围内的微生物定量分析,具体取决于后续检测方法的灵敏度[3][10]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照:使用已知浓度的标准菌株(如大肠埃希氏菌ATCC 25922)验证增菌效果。
2. 阴性对照:同步进行无菌TPS溶液的培养以排除污染。
3. 平行实验:每批次样品需至少设置2个平行样以确保结果重复性[3][7]。

五、关键实验步骤

1. 溶液配制:精确称取胰蛋白胨1.0g、氯化钠8.5g,溶于900ml蒸馏水,调节pH至7.0±0.2后定容至1000ml,121℃灭菌15分钟。
2. 样品处理:均质时间需控制在30-60秒以避免过度发热影响微生物活性。
3. 培养条件:严格监控培养箱温度波动范围(±1℃)及湿度(≥60%)[7][10]。

六、特别说明

1. 有效期:未开封的灭菌TPS溶液在2-8℃保存期为3个月,开封后需在7天内使用完毕。
2. 干扰物处理:若样品含抑菌成分,需添加中和剂(如卵磷脂、聚山梨酯80)。
3. 生物安全:实验废弃物需经121℃高压灭菌30分钟后再处理[3][7][10]。

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