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氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂/用于蜂蜜中嗜渗酵母计数_
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氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂/用于蜂蜜中嗜渗酵母计数

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氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂介绍：

用途:用于蜂蜜中嗜渗酵母菌计数。

添加剂：每瓶需配套添加 8盒 HB0296-1a 氯霉素溶液使用，每支添加于200ml氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂中。 

成分(g/L):

酪蛋白胨5.0
无水葡萄糖10.0
磷酸二氢钾1.0
硫酸镁(MgSO4·H2O）0.5
氯硝胺0.002
琼脂15.0
pH值5.6±0.225℃

检验原理：酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必需的微量元素；葡萄糖提供碳源；氯霉素抑制细菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂；氯硝胺可抑制霉菌菌落蔓延生长；甘油维持一个较低的渗透压。

用法

称取本品31.5g,另取无水甘油 200g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶 200ml,121℃高压灭菌 15 分钟,冷至 50℃左右时,每 200ml 培养基中加入 1 支氯霉素溶液 (20mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。

添加剂

氯霉素溶液（20mg）

氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂上细菌的生长特征：

a：白色念珠菌  b：酵母菌  c：大肠杆菌

氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置25±1℃需氧培养48-168小时。注：回收率计算时，用PDA 琼脂做对照培养基。
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GB 14963-2011《食品安全国家标准 蜂蜜》解读

适用范围
适用于蜂蜜中嗜渗酵母的选择性分离和计数，确保蜂蜜产品微生物指标符合食品安全要求[1][8]。
核心检测方法
基于DG18琼脂的选择性培养特性，通过氯硝胺抑制霉菌蔓延，氯霉素抑制细菌，低pH值（5.6±0.2）和高甘油浓度（18%）选择性促进嗜渗酵母生长[1][2]。
检出限与定量限
最低检测限为<100 CFU/g，定量限为≥100 CFU/g。标准限量要求≤200 CFU/g，若最高稀释度（10-2）平板上菌落数为3~14个则判定超标[8]。
质控样品要求
需验证黑曲霉（ATCC16404）、啤酒酵母（ATCC9763）的生长能力，以及大肠埃希氏菌（ATCC25922）和枯草芽孢杆菌（ATCC6633）的抑制效果[2]。
关键实验步骤
1. 培养基配制：加热溶解除氯霉素外的成分，调节pH至6.4，灭菌后加入氯霉素，最终pH应为5.6±0.2[1]。
2. 倾注平板：灭菌后冷却至50℃以下倾注，固化后36℃干燥备用[1][2]。
特别说明
培养条件为25±1℃恒温培养7天，需避光保存培养基。检测时应避免涂布法误差，优先采用倾注法或滤膜法以提高准确性[8]。

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