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含225ml 稀释液的均质袋（4789.35-2023）/用于乳酸菌检验中样品的稀释液（GB 4789.35-2023）_
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含225ml 稀释液的均质袋（4789.35-2023）/用于乳酸菌检验中样品的稀释液（GB 4789.35-2023）

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含225ml 稀释液的均质袋（4789.35-2023）介绍：

用途：用于乳酸菌检验中样品的稀释液。

成分(g/L)

胰蛋白胨15.0
氯化钠8.5

检验原理：

胰蛋白胨提供氮源；氯化钠维持渗透压。

含225ml稀释液的均质袋微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置20-25℃需氧培养45分钟。

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    一、适用范围

    本标准适用于食品中乳酸菌的微生物学检验，包括乳制品、发酵食品等，检测对象主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌。新标准于2024年3月6日替代GB 4789.35-2016，修订了乳酸菌的生化特征定义，并扩展了检测方法的适用范围[1][2]。

    二、核心检测方法

    1. 传统培养法：采用MRS琼脂培养基（用于乳杆菌属和双歧杆菌属）及MC琼脂培养基（用于嗜热链球菌），通过梯度稀释和厌氧培养进行分离计数。
    2. 实时荧光PCR法（选做方法）：新增分子生物学检测手段，通过特异性引物和探针快速定量目标菌[1][2]。

    三、检出限与定量限

    传统培养法的检出限为10 CFU/g（mL），定量范围为10⁰~10⁸ CFU/g（mL）；实时荧光PCR法检出限为10²~10³ copies/g（mL），定量范围依据标准曲线确定[1]。

    四、质控样品要求

    1. 稀释液需含15.0 g/L胰蛋白胨和8.5 g/L氯化钠，替代旧版生理盐水；
    2. MRS/MC琼脂成分含量调整，需通过培养基灵敏度验证；
    3. 质控菌株需符合生化特征（如触酶阴性、革兰氏阳性等）[1][2]。

    五、关键实验步骤

    1. 样品处理：使用含225 mL稀释液的无菌均质袋拍击均质1~2分钟；
    2. 梯度稀释：采用涡旋混匀仪和电子天平（感量0.001 g）；
    3. 培养条件：双歧杆菌需厌氧环境（36±1℃，48 h），嗜热链球菌需需氧环境（36±1℃，48 h）[1][2]。

    六、特别说明

    1. 新增实时荧光PCR法需使用DNA提取液、10×PCR缓冲液等专用试剂；
    2. 设备要求升级：冰箱温度范围调整为2℃~8℃，天平精度提高至0.001 g；
    3. 培养基开封后需避光保存，建议3个月内使用完毕[1][2]。

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