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乳酸杆菌肉汤培养基(GB5009.285-2022维生素B12的测定)/用于莱士曼乳酸杆菌增菌培养_
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乳酸杆菌肉汤培养基(GB5009.285-2022维生素B12的测定)/用于莱士曼乳酸杆菌增菌培养

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乳酸杆菌肉汤培养基(GB5009.285-2022维生素B12的测定)介绍：

用途:用于莱士曼乳酸杆菌增菌培养。

成分（g/L）

三号蛋白胨7.5
酵母浸膏7.5
磷酸二氢钾2.0
葡萄糖10.0
番茄汁2.5
聚山梨糖单油酸酯1.0
pH值6.8±0.125℃

检验原理

胨化乳和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖是乳酸菌可利用的糖；磷酸二氢钾是酸碱缓冲剂；蕃茄浸出粉有利于乳酸菌的生长。

用法

称取本品30.5g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，分装试管，每管10ml,121℃高压灭菌15分钟，制成斜面，备用。

注：培养基中含不溶性番茄粉，配制后的培养基有沉淀。

不同细菌在乳酸杆菌肉汤培养基上的生长特征：

乳酸杆菌肉汤培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。

乳酸杆菌肉汤培养基原理及现象：

乳酸杆菌肉汤培养基(GB5009.285-2022维生素B12的测定)相关产品：
产品货号产品名称产品规格产品说明及用途
HB9200厌氧稀释液Anaerobic Broth250g用于长型双歧杆菌的稀释
HB8895非乳酸菌选择性培养基Non- Lactobacillus Selective Medium250g用于非乳酸菌的选择性培养
HB9201长型双歧杆菌培养基(B)250g用于长型双歧杆菌的培养
HB9211BLB液体培养基BLB Broth Medium250g用于乳酸菌增菌培养
HB0384-9MRS 琼脂(不含葡萄糖)MRS Agar250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB0384-88-100MRS 琼脂（参比培养基）MRS Agar100g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB0384-5-1KMRS培养基（1kg）MRS Medium1000g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB9213TOS培养基TOS Propionate Medium250g用于奶制品中双歧杆菌计数
HB0382改良番茄汁培养基Tomato Juice Agar,Modified250g用于食品中乳酸菌总数测定
HB9249改良Bryant Burkey肉汤Bryant Burkey Broth250g用于青贮饲料、牛奶和乳制品中乳酸发酵梭状芽孢杆菌孢子的计数
HB0383MC培养基Chalmers Agar250g用HB0383-4替代
HB9320Nickels和Leesment培养基Nickels and Leesment Medium1000ml用于牛奶、奶制品和中温发酵剂中柠檬酸发酵的乳酸菌计数
HB9320aNL添加剂40mg*5每支添加于200ml HB9320 Nickels和Leesment培养基中
HBPT9272稀释液管（9ml）（GB4789.35-2023）9ml*20支用于乳酸菌检验中样品的稀释液
HBJ9272含225ml 稀释液的均质袋（4789.35-2023）Diluent10个/盒用于乳酸菌检验中样品的稀释液
HB8527-1双歧杆菌培养基(不含琼脂)Bifidobacterium Medium without Agar250g用于双歧杆菌的增菌培养
HB0384-14MRS 肉汤(不含葡萄糖)MRS Broth without Glucose250g用于食品中乳酸菌的选择性增菌培养
HB7034BLB琼脂BLB Medium250g用于双歧杆菌的分离培养
HB0384MRS琼脂MRS Agar250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB0385LBS琼脂LBS　agar250g用于乳酸菌检测和分离培养
HB0390M17琼脂M17 Agar250g用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
HB0391M17肉汤M17 Broth250g用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和增菌培养
HB0392乳酸杆菌选择性琼脂Lactobacillus Selective Agar250g用于乳酸杆菌检测和分离培养
HB0393APT琼脂APT Agar250g用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸硫酸胺素菌的培养
HB0395BL琼脂培养基BL Agar Medium250g用于双歧杆菌分离培养（GB标准）
HB0396BBL琼脂培养基BBL Agar Medium250g用于双歧杆菌分离培养（GB标准）
HB0397TPY琼脂培养基TPY Agar Medium250g用于双歧杆菌分离培养（GB标准）
HB0398PYG液体培养基基础PYG Broth Medium Base250g用于双歧杆菌增菌培养，使用时需加入氯化血红素和维生素K1（GB标准）
HB8616-2溴甲酚紫平板计数琼脂培养基（BCP）Bromocresol purple Plate Count Agar Medium250g用于活乳酸菌菌落总数测定
HB9272稀释液（GB4789.35-2023）Diluent250g用于乳酸菌检验中样品的稀释液
HB0384-51MRS琼脂培养基（GB4789.35-2023）MRS Agar Medium250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB0384-111莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良MRS琼脂培养基（GB4789.35-2023）250g用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数
HB0383MC培养基MC Medium250g用HB0383-4替代
HB0391-100M17肉汤M17 Broth100g用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和增菌培养
HB0390-100M17琼脂M17 Agar100g用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
HB8636-1乳酸杆菌琼脂培养基Lactobacillus Agar Medium250g用于植物乳杆菌的活化培养
HB8637-1乳酸杆菌肉汤培养基Lactobacillus Broth Medium250g用于植物乳杆菌的增菌培养
HB0393-1APT肉汤APT Broth250g用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸硫酸胺素菌的培养
HB8637乳酸杆菌肉汤培养基（2023版烟酸、生物素测定）Lactobacillus broth Medium250g用于乳酸杆菌增菌培养
HB0384-1MRS肉汤MRS Broth250g用于食品中乳酸菌的选择性增菌培养
HB0394双歧杆菌BS培养基Bifidobacterium BS Medium250g用于双歧杆菌分离培养
2100500氯化血红素Hemin Chloride1g每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂或改良GAM琼脂中
2100501维生素K1vitamin K11g每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂中
HB8527双歧杆菌培养基Bifidobacterium Medium250g用于双歧杆菌的分离培养
HB8570TPY肉汤TPY Broth250g用于双歧杆菌的增菌培养
HB8570-1TPY液体培养基TPY Fliud Medium250g用于双歧杆菌的增菌培养
HB8582BCG牛乳培养基BCG Milk Medium250g用于乳酸菌的分离培养
HB0396-1双歧杆菌琼脂培养基Bifidobacterium Medium250g用于双歧杆菌的分离培养
HB8799含糖牛肉汤培养基Beef Broth Medium(with Sugar)250g用于乳酸菌培养
HB8801石蕊牛奶培养基Litmus mike medium250g用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验
HB8804乳酸杆菌选择性肉汤Lactobacillus Selective Broth250g用于乳酸杆菌增菌培养
HB8800牛奶培养基Milk Medium250g用于乳酸菌凝固力及乳酸鉴别试验
HB0385-1乳酸杆菌选择性培养基Lactobacillus Selective Agar250g用于乳酸杆菌的分离培养
HB0384-5MRS培养基MRS Medium250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB8459微生物学接种体肉汤Micro Inoculum Broth250g用于阿拉伯乳酸杆菌的增菌培养
HB8521双歧杆菌生化用基础培养基The Biochemical Basis of Bifidobacterium Medium250g用于双歧杆菌生化试验用基础培养基
HB8636乳酸杆菌琼脂培养基（2023版烟酸、生物素测定）Lactobacillus Agar Medium250g用于乳酸杆菌分离培养
HB8682乳酸杆菌糖发酵培养基Lactobacillus Carbohydrate Fermentation Medium250g用于乳酸杆菌糖发酵培养基
HB8777BBL液体培养基BBL Liquid Medium250g用于双歧杆菌增菌培养
HB0384-7酸化MRS琼脂（AMRSA）Acidification MRS Agar250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB8539GYP白亚琼脂培养基GYP Medium250g用于乳酸菌的分离培养
HB8616BCP寒天培地（含琼脂）BCP Medium250g用于食品中乳酸菌的计数
HB8744LAMVAB琼脂LAMVAB Agar250g用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
HB0394-1双歧杆菌BS培养基（不含琼脂）BS Medium250g用于双歧杆菌增菌培养
HB8835RSMA培养基RSMA Medium250g用于乳酸菌分离培养
HB0384-11莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良MRS培养基250g用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数；用HB0384-111替代
HB0384-11a半胱氨酸盐酸盐溶液（冻干粉）0.1g*10支添加在HB0384-11中做添加剂使用
HB0384-6a莫匹罗星锂盐（5mg/支）Lin-Mupirocin5mg*5支每支添加于100ml莫匹罗星锂盐改良MRS培养基中
HB8849S1培养基S1 Medium250g用于乳酸链球菌素效价测定
HB9150选择性改良NPNL培养基Selective NPNL Medium,Modified250g用于双歧杆菌选择性分离培养
HB9152BC琼脂BC Agar250g用于药物制剂中乳酸菌的培养和计数
HB9156HHD琼脂HHD Agar250g用于同型发酵和异型发酵乳酸菌的鉴别培养
HB9155Mitsuoka’s缓冲液Mitsuoka’S Buffer250g适用于含有严格厌氧的双歧杆菌活菌产品的稀释
HB0384-6莫匹罗星锂盐改良MRS培养基 Li-Mupirocin MRS Medium，Modified250g用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数
HB0384-71酸化MRS培养基Acidified MRS Medium250g用于酸奶中德氏乳杆保加利亚亚种计数
HB8896菌种储备用琼脂培养基Strain Store Agar Medium250g用于食品中叶酸测定时鼠李糖乳杆菌的活化和保存
HB9176综合剂培养基Comprehensive Reagent Medium250g
HB0398-1PYG液体培养基(不含葡萄糖)PYG Broth Base without Glucose250g用于双歧杆菌的增菌培养
HB8527-2双歧杆菌培养基（DSMZ配方）Bifidobacterium Medium250g用于双歧杆菌的增菌培养
HB8527-3双歧杆菌琼脂培养基（DSMZ配方）Bifidobacterium Agar Medium250g用于双歧杆菌的培养
HB8636-2乳酸杆菌琼脂培养基（GB5009.285-2022维生素B12的测定）Lactobacillus Agar Medium250g用于莱士曼乳酸杆菌活化培养（GB5413.14-2010）

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GB 5009.285-2022 核心解读

适用范围
本标准适用于婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品中维生素B12的测定。第一法（液相色谱法）适用于上述食品基质；第二法（液相色谱-质谱法）扩展至即食谷物、烘焙食品、果冻及饮料；第三法（微生物法）仅限婴幼儿食品及乳制品[1][3]。
核心检测方法
1. 第一法：酶解处理后用氧化剂转化钴胺素异构体，免疫亲和柱净化浓缩后通过反相液相色谱分离，紫外检测定量
2. 第二法：基于液相色谱-质谱联用技术，适用于复杂基质的高灵敏度检测
3. 第三法：微生物法利用特定菌株对维生素B12的特异性需求进行生物测定[1][3]
检出限与定量限
液相色谱法检出限为0.03μg/100g，定量限0.1μg/100g；液相色谱-质谱法灵敏度更高，检出限可达0.01μg/100g；微生物法检出限为0.05μg/100g[1][4]
质控样品要求
标准系列工作溶液需现用现配，浓度梯度为30-200ng/mL；质控样需包含空白基质加标样本，加标回收率应控制在85%-115%，同批次测试需包含10%平行样[1]
关键实验步骤
1. 酶解处理：37℃恒温水浴酶解16小时
2. 氧化转化：加入氰化钾溶液转化异构体
3. 净化浓缩：免疫亲和柱流速控制在1mL/min
4. 色谱条件：C18色谱柱，流动相为甲醇-磷酸盐缓冲体系[1][3]
特别说明
1. 含氰试剂操作需在通风橱进行
2. 免疫亲和柱保存温度需≤8℃
3. 微生物法需严格无菌操作，菌种活化需使用特定培养基
4. 乳制品检测需注意脂肪干扰，需增加离心去脂步骤[1][3]

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