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长型双歧杆菌培养基(B)/用于长型双歧杆菌的培养

HB9201

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250g

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长型双歧杆菌培养基(B)介绍：

用途:用于长型双歧杆菌的培养。

用法：

称取本品61.0g加热煮沸，完全溶解于1000ml蒸馏水或纯化水中，分装三角瓶每瓶200ml, 115℃高压灭菌30min,冷至45℃左右时备用。1)长型双歧杆菌培养基(B1):每200ml培养基中加入无菌脱纤维羊血20ml,混匀.倾入无菌平皿中,冷却备用:

2)长型双歧杆菌培养基(B2):每200ml培养基中加入无菌脱纤维羊血20ml和20mg无菌四环素，混匀,倾入无菌平皿中，冷却，备用。

注：培养基中含少量氯化钙、硫酸镁，灭菌后可能出现少量沉淀。

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一、国家标准 GB 4789.34—2016 详细解读

适用范围：
本标准适用于食品中双歧杆菌的检验，特别是乳制品（如乳粉）及益生菌产品的微生物学检测[1]。明确规定了样品处理、培养基选择及计数方法的技术要求。

核心检测方法：
1. 样品稀释：使用无菌稀释液梯度稀释样品。
2. 培养基选择：推荐双歧杆菌选择性培养基（如BBL培养基）或MRS培养基（需添加半胱氨酸盐酸盐）[1]。
3. 培养条件：37±1℃厌氧培养72小时，记录典型菌落形态。

检出限与定量限：
• 检出限：≥10 CFU/g（适用于固体样品）。
• 定量限：10²~10⁹ CFU/g，需满足平行样结果再现性限≤0.45[1]。

质控样品要求：
1. 阳性对照：使用长双歧杆菌标准菌株（ATCC 15707或等效株）。
2. 阴性对照：无菌稀释液空白试验。
3. 平行试验：同一批次样品需进行双平板培养。

关键实验步骤：
1. 样品前处理：均质时间≤2分钟，避免温度过高。
2. 培养基制备：需新鲜配制并验证选择性（抑制非目标菌≥90%）。
3. 计数规则：仅计数具有双歧杆菌典型形态（不规则边缘、乳白色凸起）的菌落。

特别说明：
1. 培养基差异：BBL培养基检出率较MRS高约15%~20%，但MRS操作便捷性更优[1]。
2. 厌氧条件：需使用厌氧罐（氧气浓度≤1%）。
3. 结果报告：当两种培养基结果差异＞0.5 log值时需复检。

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