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酸化MRS培养基/用于酸奶中德氏乳杆保加利亚亚种计数

HB0384-71

Acidified MRS Medium

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250g

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见证书

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酸化MRS培养基介绍：

用途：用于酸奶中德氏乳杆保加利亚亚种计数成分（g/L）

Peptone（tryptic digest ofcasein）/胰酪蛋白胨	10.0
Meat extract/牛肉浸粉	8.0
Yeast extract/酵母浸粉	4.0
Glucose（C₈H₁₂O₈）/葡萄糖	20.0
Dipotassium hydrogen orthophosphate（K₂HPO₄）/磷酸氢二钾	2.0
Diammonium citrate[C₆H₆O₇（NH₄）₂]/柠檬酸二氢铵	2.0
Sodium acetate trihydrate（CH₃CO₂Na·3H₂O）/三水乙酸钠	5.0
Magnesium sulfate heptahydrate（MgSO₄·7H₂O）/七水硫酸镁	0.2
Manganese sulfate tetrahydrate（MnSO₄·4H₂O）/四水硫酸锰	0.04
Tween 80（sorbitanmono-oleate）/吐温80	1.0
Agar/琼脂	20.0
pH值5.3-5.5	25℃

用法： 称取本品73.25g,加热煮沸完全溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中有少量的硫酸镁和硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀。

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2100501	维生素K1vitamin K1	1g	每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂中
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食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验

适用范围

本标准适用于食品中乳酸菌的分离培养、计数及鉴定，包括发酵乳制品、益生菌制剂等各类含活性乳酸菌的食品样品检测[10]。

核心检测方法

采用酸化MRS琼脂培养基进行选择性培养，通过倾注平板法或涂布法实现乳酸菌的定量检测，配合菌落形态观察和生化鉴定完成定性分析[10]。

检出限与定量限

定量检测限为10 CFU/g(mL)，当样品中乳酸菌含量低于此值时需使用MPN法；定量范围10^1-10^8 CFU/g(mL)，超出范围需梯度稀释后检测[10]。

质控样品要求

每批次实验需同步进行阳性对照（标准菌株接种）和阴性对照（无菌生理盐水），培养基性能验证要求接种目标菌回收率≥70%，非目标菌抑制率≥90%[10]。

关键实验步骤

1. 样品预处理：25g(mL)样品+225mL灭菌生理盐水均质；
2. 梯度稀释：采用10倍系列稀释法；
3. 培养基配制：pH值精确调节至5.7±0.1，115℃灭菌15分钟；
4. 培养条件：36℃±1℃厌氧培养72±3小时[10]。

特别说明

1. 培养基开封后需密封避光保存，已融化培养基禁止重复灭菌；
2. 检测含双歧杆菌样品时需补充0.05% L-半胱氨酸；
3. 厌氧培养需使用专业培养装置，氧气浓度≤5%[10]。

[10] GB4789.35-2023 食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验

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