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半胱氨酸盐酸盐、万古霉素和新生霉素的改良MRS培养基/用于食品中片球菌属检验和计数

HB0384-52

MRS Agar Medium with Cysteine hydrochloride、Vancomycin and Novobiocin

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250g

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半胱氨酸盐酸盐、万古霉素和新生霉素的改良MRS培养基介绍：

用途：用于食品中片球菌属检验和计数。

添加剂：

每瓶需配套添加2盒HB0384-11a 半胱氨酸盐酸盐溶液（冻干粉）、4盒HB8744d 万古霉素(2mg)和4盒HB0384-52a 新生霉素(0.02mg)使用；

每200ml培养基中加入过滤除菌的HB0384-11a 半胱氨酸盐酸盐0.1g，HB8744d 万古霉素2mg和HB0384-52a 新生霉素0.02mg。

成分（g/L）

蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	5.0
酵母浸粉	4.0
葡萄糖	20.0
K₂HPO₄·7H₂O	2.0
柠檬酸三铵	2.0
醋酸钠·3H₂O	5.0
MgSO₄·7H₂O	0.2
MnSO₄·7H₂O	0.05
琼脂	15.0
吐温80	1.0
pH值6.2±0.2	25℃

用法：

称取本品64.3g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶2000ml，121℃高压灭菌15-20min，冷至48℃~50℃左右时，每200ml培养基中加入过滤除菌的半胱氨酸盐酸盐0.1g，万古霉素2mg和新生霉素0.02mg，混匀，倾入无菌平皿，备用。

半胱氨酸盐酸盐、万古霉素和新生霉素的改良MRS培养基同名产品推荐：

HB0384-52a 新生霉素（0.02mg） 0.02mg*5支/盒

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国家标准解读：《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》

标准名称及标准号

GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》

适用范围	适用于食品中乳酸菌（包括片球菌属）的分离、计数及鉴定，涵盖改良MRS培养基的使用要求。

核心检测方法

采用选择性培养基（改良MRS培养基）进行目标菌培养，通过添加半胱氨酸盐酸盐（0.2g/L）、万古霉素（0.01g/L）和新生霉素（0.02g/L）抑制杂菌，37℃厌氧培养48小时。

检出限与定量限

检出限为1 CFU/g（或mL），定量限为10 CFU/g（或mL），需通过梯度稀释法验证。

质控样品要求

需使用标准菌株（如片球菌属ATCC 35535）作为阳性对照，同时以大肠杆菌ATCC 25922为阴性对照，验证培养基选择性。

关键实验步骤

1. 样品均质与稀释；
2. 改良MRS培养基配制（含特定抗生素）；
3. 厌氧培养及典型菌落观察；
4. 革兰氏染色及过氧化氢酶试验确认。

特别说明	万古霉素和新生霉素需现用现配，避免长时间高温灭菌导致失效；半胱氨酸盐酸盐需在培养基冷却至50℃后加入。

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